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全蛋白提取試劑盒(強) 貨號:SP35097

中文名: 全蛋白提取試劑盒(強) 貨號:SP35097

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儲存條件:   -20℃

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貨號:   SP35097

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發(fā)布時間:   2024-12-22 01:57:58

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儲存條件-20℃,避光,有效期至少1年
單位
規(guī)格   50T    100T
全蛋白提取試劑盒(強)用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成:

裂解液(強)

100 ml

2-8 oC

磷酸酶抑制劑(100x

1ml

-20 oC

蛋白酶抑制劑(100x

1 ml

PMSF100x

1ml


操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;
稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;
將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清至新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數(shù)加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

注意:
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。


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規(guī)格說明

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