賽培新增產(chǎn)品文章:人雌二醇和孕酮 ELISA試劑盒
發(fā)布時(shí)間:2024-04-09 14:09:25
脂聯(lián)素對 KGN 細(xì)胞雌激素合成和氧化應(yīng)激的影響
于婷喬1,劉藝芳1,袁慶葉1,石興宇1,李欣2* (1.北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院國際教育學(xué)院,北京 102442;2.華大智造科技股份有限公司,深圳 518000) 【摘要】 目的 探討脂聯(lián)素(ADP)對人卵巢顆粒細(xì)胞系(KGN)雌激素合成、氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡水平的影響。 方法 以 KGN 為細(xì)胞模型,外源添加 ADP或聯(lián)合毛喉素(FSK)處理24h,同時(shí)設(shè)置空白對照組,ELISA 方法檢測細(xì)胞中雌二醇和孕 酮水平,Westernblot方法檢測芳香化酶的蛋白表達(dá)水平,分析 ADP對 KGN 細(xì)胞中雌激素合成的影響;利用氧化應(yīng)激誘導(dǎo)劑 叔丁基過氧化氫(tBHP)與 ADP聯(lián)合或單獨(dú)處理 KGN 細(xì)胞,同時(shí)設(shè)置空白對照組,藥物處理24h后,利用 DCFH-DA 法檢測 細(xì)胞活性氧(ROS)水平,并檢測丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及總抗氧化能力(T-AOC)等氧化應(yīng)激指標(biāo)水平,利用 MTT和流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞活力和細(xì)胞凋亡,分 析 ADP對tBHP誘導(dǎo)的細(xì)胞氧化應(yīng)激和凋亡的改善作用。 結(jié) 果 (1)在 FSK 存在的前提下,細(xì)胞經(jīng)過 ADP處理后,KGN 細(xì)胞合成的雌二醇和孕酮水平顯著上升(P<0.05)。單獨(dú) FSK 處理以及聯(lián) 合 ADP處理均顯著提高 KGN 細(xì)胞的芳香化酶表達(dá)水平(P<0.05),聯(lián)合 ADP處理后 KGN 細(xì)胞芳香化酶表達(dá)水平有進(jìn)一步 上升趨勢,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(2)ADP對 抗tBHP誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與 對 照 相 比,添 加tBHP 后 KGN 細(xì)胞中 ROS、MDA 水平顯著升高(P<0.05),SOD活性顯著下降(P<0.05)。聯(lián)合 ADP處理可以顯著下調(diào)tBHP引 起的 ROS和 MDA 水平的升高(P<0.05),上調(diào)SOD活性(P<0.05);單 獨(dú) ADP處 理 可 以 上 調(diào) SOD1的蛋白表達(dá)水平(P< 0.05)。(3)流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示,與對照組相比,tBHP處理后,KGN 細(xì)胞凋亡水平顯著增加(P<0.05),而聯(lián)合 ADP處 理可以顯著緩解tBHP引起的細(xì)胞凋亡(P<0.05)。 結(jié)論 ADP可能通過影響芳香化酶的表達(dá)促進(jìn) KGN 細(xì)胞中雌二醇和 孕酮的合成;ADP可能通過上調(diào)SOD活性,抑制氧化應(yīng)激,從而緩解tBHP誘導(dǎo)的 KGN 細(xì)胞凋亡。 【關(guān)鍵詞】 多囊卵巢綜合征; 脂聯(lián)素; 氧化應(yīng)激; 細(xì)胞凋亡 【中圖分類號】 R711.75 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A
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